La validación de una sala limpia es la evidencia documentada de que alcanza, y mantiene, la limpieza para la que fue diseñada. En el lenguaje GMP este trabajo se llama cualificación de salas limpias: un conjunto planificado de ensayos sobre filtros, flujo de aire, presión, partículas y microorganismos, realizados en reposo y en operación, frente a los límites del Anexo 1 de las GMP de la UE y de la serie ISO 14644. Esta guía enumera los ensayos, los valores que realmente figuran en las normas y la frecuencia con la que debe repetirse cada uno.
Puntos clave
- La cualificación (validación) de una sala limpia demuestra que cumple el grado especificado; es una actividad distinta de la monitorización ambiental rutinaria, como exige el Anexo 1 de las GMP de la UE (2022), apartado 4.24.
- El Anexo 1, apartado 4.25, enumera nueve ensayos de cualificación, desde la prueba de fugas de filtros y el flujo de aire hasta la contaminación microbiana, la recuperación y la estanqueidad del confinamiento.
- La clasificación por recuento total de partículas sigue la ISO 14644-1:2015, que vincula el número mínimo de puntos de muestreo a la superficie: 1 punto hasta 2 m², 27 puntos hasta 1.000 m².
- El Anexo 1 fija un intervalo máximo de recualificación de 6 meses para las zonas de grado A y B y de 12 meses para los grados C y D.
- La mayoría de los fallos de cualificación nacen en el diseño: una sala que no mantiene su escalón de presión o que se recupera demasiado despacio no aprobará el día del ensayo.
¿Qué es la validación de una sala limpia?
La validación de una sala limpia es el proceso de demostrar, con ensayos documentados, que una sala limpia o un equipo de aire limpio funciona como exige su especificación. Las GMP de la UE lo llaman cualificación y piden seguir la metodología del Anexo 15, desde la cualificación de diseño hasta la cualificación de funcionamiento.
Varios términos relacionados se usan a menudo como sinónimos, pero no significan lo mismo:
- La cualificación es la evaluación global de si una sala limpia es conforme con su uso previsto (Anexo 1, 4.25). «Validación» es la palabra habitual en la industria para ese mismo trabajo.
- La clasificación es una parte de la cualificación: mide la concentración total de partículas en el aire y asigna una clase ISO o un grado GMP (Anexo 1, 4.26).
- La certificación es el término que se usa sobre todo en EE. UU. y fuera del sector farmacéutico para el informe de ensayo que confirma una clase ISO 14644-1.
- La monitorización ambiental es el muestreo rutinario durante la producción. El Anexo 1 (4.24) pide diferenciarla claramente de la cualificación.
¿Cuáles son las etapas de la cualificación de una sala limpia?
La cualificación de salas limpias sigue el ciclo de vida del Anexo 15 de las GMP: especificación de requisitos de usuario y, después, cualificación de diseño, de instalación, de operación y de funcionamiento. Cada etapa responde a una pregunta distinta, desde «¿es correcto el diseño?» hasta «¿mantiene la sala su grado con personal trabajando?».
- Especificación de requisitos de usuario (URS): grado de cada sala, proceso, régimen de presiones, rangos de temperatura y humedad.
- Cualificación de diseño (DQ): comprobación documentada de que los planos, el diseño HVAC y las fichas de sala cumplen la URS y las GMP.
- Cualificación de instalación (IQ): filtros, conductos, control e instrumentos están instalados y calibrados según lo especificado.
- Cualificación de operación (OQ): la sala y su HVAC se ensayan «en reposo», con los equipos instalados pero sin personal.
- Cualificación de funcionamiento (PQ): la sala se ensaya «en operación», con el número máximo de personas realizando o simulando el trabajo rutinario (Anexo 1, 4.29).
El Anexo 1 (4.26) recomienda realizar la clasificación inicial durante operaciones simuladas, y la reclasificación durante operaciones simuladas o durante una simulación del proceso aséptico (APS), para que el propio ensayo no ponga en riesgo el producto.
¿Qué ensayos incluye la cualificación de una sala limpia?
El Anexo 1 de las GMP de la UE (2022), apartado 4.25, enumera nueve ensayos que la cualificación debe incluir cuando sean pertinentes para la instalación. Los métodos de ensayo se describen en la ISO 14644-3.
| Ensayo | Qué demuestra | Valor indicado en la norma |
|---|---|---|
| Fugas e integridad de los filtros instalados | Los filtros HEPA y sus juntas no tienen fugas | Ninguna fuga por encima del criterio de aceptación del protocolo |
| Caudal y velocidad del aire | La impulsión coincide con el diseño; el flujo unidireccional protege la zona de trabajo | 0,36–0,54 m/s en la posición de trabajo con flujo unidireccional (valor orientativo, 4.30) |
| Diferencial de presión | El aire va de las zonas más limpias a las menos limpias | Mínimo de 10 Pa entre salas adyacentes de distinto grado (valor orientativo, 4.14) |
| Dirección y visualización del flujo de aire | Los ensayos de humo muestran el patrón de aire previsto en los puntos críticos | Cualitativo; debe correlacionarse con las medidas de velocidad (4.30) |
| Contaminación microbiana del aire y de superficies | La contaminación viable está dentro de los límites del grado | Tabla 2 del Anexo 1 (ver abajo) |
| Temperatura y humedad relativa | El HVAC mantiene los rangos fijados en la URS | Los fija el proceso y el producto, no el Anexo 1 |
| Recuperación | La sala vuelve a sus límites «en reposo» tras una perturbación | Periodo de «limpieza» (clean up): valor orientativo inferior a 20 minutos (4.29) |
| Estanqueidad del confinamiento | No entra aire sin filtrar por techos, juntas o pasamuros | Ninguna fuga por encima del criterio de aceptación del protocolo |
| Clasificación (partículas totales) | La concentración de partículas cumple el grado, en reposo y en operación | Tabla 1 del Anexo 1 e ISO 14644-1 |
El ensayo de recuperación de la ISO 14644-3 suele realizarse como tiempo de recuperación 100:1: el tiempo que necesita la sala para bajar desde una concentración de desafío 100 veces superior a su objetivo hasta ese objetivo. Es el ensayo que pone de manifiesto de forma más directa una tasa de renovación de aire insuficiente, de ahí su relación con el diseño HVAC de salas limpias.
La cualificación microbiológica usa los límites de la tabla 2 del Anexo 1, que pide (4.31) cubrir los estados «en reposo» y «en operación».
| Grado | Muestra de aire (UFC/m³) | Placas de sedimentación (UFC/4 horas) | Placas de contacto (UFC/placa) |
|---|---|---|---|
| A | Sin crecimiento | ||
| B | 10 | 5 | 5 |
| C | 100 | 50 | 25 |
| D | 200 | 100 | 50 |
¿Cuántos puntos de muestreo exige la ISO 14644-1?
La ISO 14644-1:2015 fija el número mínimo de puntos de muestreo a partir de la superficie de la sala mediante una tabla (anexo A, tabla A.1): 1 punto para 2 m² o menos, hasta 27 puntos para 1.000 m². Por encima de 1.000 m², el mínimo se calcula como 27 × superficie / 1.000, redondeado hacia arriba.
| Superficie menor o igual a (m²) | Número mínimo de puntos |
|---|---|
| 2 | 1 |
| 10 | 5 |
| 24 | 6 |
| 52 | 10 |
| 104 | 16 |
| 232 | 22 |
| 436 | 25 |
| 1.000 | 27 |
| Más de 1.000 | 27 × superficie / 1.000, redondeado hacia arriba |
La tabla ofrece al menos un 95 % de confianza de que al menos el 90 % de la sala cumple el límite de la clase. Después, la sala se divide en secciones de superficie casi igual, con un punto en cada una. Cada muestra debe ser suficiente para detectar al menos 20 partículas en el límite de la clase para el mayor tamaño de partícula considerado, con un mínimo de 2 litros y 1 minuto por punto. Para los grados A y B, el Anexo 1 (4.28) pide puntos adicionales en los lugares críticos, como el punto de llenado, elegidos mediante una evaluación de riesgos documentada.
¿Con qué frecuencia hay que recualificar una sala limpia?
El Anexo 1 de las GMP de la UE (4.32) fija un intervalo máximo de 6 meses para la recualificación de las zonas de grado A y B y de 12 meses para los grados C y D. También se requiere recualificación tras una acción correctiva o un cambio significativo en el equipo, la instalación o el proceso.
El alcance mínimo de la recualificación según el 4.32 incluye la clasificación por concentración total de partículas, el ensayo de integridad de los filtros terminales, la medida del caudal de aire, la verificación del diferencial de presión entre salas y un ensayo de velocidad del aire. Para los grados B, C y D, el ensayo de velocidad se basa en una evaluación de riesgos; cuando el flujo no es unidireccional, lo sustituye un ensayo de recuperación. Entre los cambios que obligan a recualificar figuran una interrupción del movimiento del aire, un cambio en el diseño de la sala o en las consignas del HVAC y un mantenimiento especial como el cambio de los filtros terminales.
En EE. UU., la guía de la FDA sobre medicamentos estériles fabricados por procesado aséptico (2004) sigue la misma lógica de cualificación inicial, reensayo periódico y control de cambios, sin fijar un intervalo único para todos los ensayos.
Errores frecuentes en la validación de salas limpias
- Tratar el programa de monitorización ambiental como si fuera la cualificación, algo que el Anexo 1 (4.24) separa de forma explícita.
- Clasificar solo «en reposo» y no ensayar nunca la sala con todo el personal en operación.
- Situar los puntos de muestreo por comodidad en lugar de dividir la sala en secciones iguales y añadir los puntos críticos.
- Descubrir en la OQ que una sala no mantiene sus 10 Pa con una puerta abierta o no se recupera dentro de su periodo de limpieza: un problema de diseño que ningún protocolo corrige.
- Cambiar consignas del HVAC o filtros terminales sin pasar por el control de cambios y la recualificación.
La cualificación no hace conforme una sala limpia: muestra si el diseño ya lo era.
Preguntas frecuentes
¿Cómo se valida una sala limpia?
Se definen el grado y los requisitos en una URS, se comprueba el diseño (DQ), se verifica la instalación (IQ) y después se ensaya la sala en reposo (OQ) y en operación (PQ). Los ensayos cubren fugas de filtros, flujo de aire, diferencial de presión, visualización del flujo, partículas, microorganismos, temperatura, humedad, recuperación y confinamiento.
¿Qué diferencia hay entre validación y certificación de una sala limpia?
La validación, o cualificación en términos GMP, es la prueba documentada completa de que una sala limpia es apta para su uso previsto, incluidos los ensayos microbiológicos y de recuperación. La certificación suele referirse al informe de ensayo que confirma una clase de partículas ISO 14644-1. En farmacia, un certificado por sí solo no sustituye la cualificación según los Anexos 1 y 15.
¿Qué ensayos incluye la cualificación de una sala limpia?
El Anexo 1 de las GMP de la UE (2022), apartado 4.25, enumera las fugas e integridad de los filtros instalados, el caudal y la velocidad del aire, el diferencial de presión, la dirección y visualización del flujo, la contaminación microbiana del aire y de superficies, la temperatura, la humedad relativa, la recuperación y la estanqueidad del confinamiento. La clasificación por partículas también forma parte (4.26).
¿Cuántos puntos de muestreo exige la ISO 14644-1?
La tabla A.1 de la ISO 14644-1:2015 vincula el número mínimo de puntos a la superficie: 1 punto hasta 2 m², 5 hasta 10 m², 10 hasta 52 m², 16 hasta 104 m² y 27 hasta 1.000 m². Por encima de 1.000 m², el mínimo es 27 × superficie / 1.000, redondeado hacia arriba.
¿Con qué frecuencia hay que recualificar una sala limpia GMP?
El Anexo 1 de las GMP de la UE (2022), apartado 4.32, fija un intervalo máximo de 6 meses para las zonas de grado A y B y de 12 meses para los grados C y D. También hay que recualificar tras una acción correctiva o un cambio significativo, como una modificación de las consignas del HVAC o el cambio de los filtros terminales.
¿Qué diferencia hay entre «en reposo» y «en operación»?
«En reposo» significa que los servicios están instalados y el HVAC funciona, y los equipos están instalados pero parados y sin personal presente. «En operación» significa que la sala funciona en su modo operativo definido, con el número máximo de personas realizando o simulando el trabajo rutinario. El Anexo 1 exige la clasificación en ambos estados.
Cómo ayuda PharmaTwin
PharmaTwin es un simulador de instalaciones farmacéuticas que comprueba las decisiones de diseño que la cualificación ensayará más adelante. A medida que coloca salas y les asigna un grado ISO o GMP, calcula las tasas de renovación de aire, las cascadas de presión y los flujos de personal y materiales: una sala que no puede mantener su escalón de presión o alcanzar su grado se señala en la fase de diseño, antes de la DQ, y no el día del ensayo. Sirve de base de zonificación y HVAC para la URS; no sustituye los ensayos de cualificación in situ.